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人尿酸轉運蛋白在腎小管上皮細胞的定位表達研究 【?2006-01-20 發布?】 臨床報道
(北京)為了明確人尿酸轉運蛋白(hUAT)在人腎小管上皮細胞(HKC)內的定位表達情況。研究者利用DNA重組技術構建hUAT。綠色熒光蛋白的融合基因分別導入人HKC及非洲爪蟾卵細胞。構建hUAT的谷胱甘肽轉移酶(GST)融合表達載體并制備抗hUAT的多克隆抗體。利用免疫熒光、Western印跡及激光共聚焦顯微鏡等技術觀察hUAT在人HKC的定位表達。結果成功制備了兔抗hUAT-GST多克隆抗體。利用該抗體及構建的pEGFP-hUAT熒光表達載體進行Western印跡和免疫熒光檢測,結果表明hUAT是一種膜蛋白,并且表達于人HKC胞膜上,Northern blot結果也表明人HKC在高尿酸環境中的hUAT表達水平明顯上調??梢奾UAT并非典型的膜轉運蛋白,可能是以二聚體的形式才能夠表達在細胞膜上,它在細胞內的定位表達可能需要特殊的轉錄調控機制。
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